Avaliação de Técnicas de Seleção de Espermatozoides: O Impacto na Viabilidade Celular Usando Citometria de Fluxo

Resumo

Objetivo: Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos de diferentes técnicas de seleção espermática sobre parâmetros seminais e características estruturais utilizando citometria de fluxo, com foco na viabilidade celular, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) e integridade acrossômica.Métodos: Amostras de sêmen de oito voluntários normospérmicos foram submetidas a duas técnicas de seleção espermática: lavagem simples e centrifugação em gradiente de densidade. Após o processamento, as amostras foram analisadas por citometria de fluxo para avaliar motilidade, viabilidade, produção de ROS, peroxidação lipídica, reação acrossômica e estabilidade da membrana plasmática.Resultados: O método de gradiente de densidade aumentou significativamente a motilidade total (70,75% ± 12,87%) em comparação tanto com o sêmen in natura (55,63% ± 8,55%) quanto com a técnica de lavagem (53,13% ± 4,61%). Além disso, a porcentagem de espermatozoides vivos foi maior no grupo de gradiente de densidade (71,63% ± 13,72%) do que no grupo lavado (54,50% ± 9,53%). Não houve diferença significativa na produção de ROS entre as técnicas; entretanto, a técnica de gradiente de densidade reduziu o número de células mortas produtoras de ROS (0,04% ± 0,06%) em comparação com a técnica de lavagem (0,13% ± 0,23%). Observou-se aumento no número de células com acrossomo reagido após a centrifugação em gradiente de densidade (25,79% ± 15,07%) em comparação com o sêmen in natura (8,80% ± 4,28%).Conclusão: A centrifugação em gradiente de densidade é superior à técnica de lavagem na seleção de espermatozoides viáveis e móveis: melhorou significativamente a motilidade total e a viabilidade. Embora a técnica de gradiente de densidade não tenha aumentado o estresse oxidativo, ela esteve associada a maior incidência de reação acrossômica, o que pode ter implicações nos resultados de fertilidade.