Implementando CRISPR/Cas9 no laboratório: um guia de como editar células para criar modelos celulares

Abstract

Modelos celulares são muito utilizados na pesquisa experimental e, idealmente, constituem o primeiro nível de modelo de estudo. A utilização de modelos celulares permite, por exemplo, a primeira avaliação de tolerabilidade e de segurança de fármacos e tratamentos experimentais, além de permitir a redução do uso de animais de experimentação. Muito conhecimento já foi gerado cultivando células de pacientes com patologias diversas – de doenças genéticas hereditárias a câncer. Entretanto, muitos pesquisadores não têm acesso às células de pacientes. O desenvolvimento da técnica de edição de genes CRISPR/Cas9, na última década, tornou a geração de modelos celulares muito mais acessível para pesquisadores do mundo todo, por permitir a edição de genes de interesse em múltiplos tipos celulares, incluindo células imortalizadas e de fácil cultivo. Nesse contexto, este artigo descreve como a edição gênica funciona e como utilizar essa ferramenta in vitro para produzir modelos celulares para estudo. Nosso objetivo é apresentar essa metodologia a laboratórios que tenham interesse em implementar edição genômica em seus projetos de pesquisa.